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CALUX
®是经美国EPA批准的一种生物检测方法(方法号SW 846-4435),可用于检测土壤、水、烟气、污泥、饲料、添加剂以及生物组织中的二噁英、呋喃和多氯联苯,该方法已得到美国(FDA和EPA)、欧盟、智利、日本等国的广泛采用,是大量筛查二噁英类污染物的新型快速检测技术。
一、
CALUX ®的原理
CALUX
®是利用专利的基因技术改造细胞株(美国专利号5,854,010)进行检测的一种生物检测方法,该细胞株可因芳香烃受体被激活而通过荧光素酶表达。该细胞株和环境中的芳香烃二恶英类物质接触,使其增加合成 CYP1A
1 蛋白质和荧光素酶蛋白质,通过测定荧光素酶的发光量,即可求得样品中的二恶英类物质的TEQs浓度。
CALUX
®技术配套的样品处理过程也获得了美国专利(专利号6,720,431)。该过程可以有效分离PCBs
和PCDDs/PCDFs,进而计算出分离后PCBs和PCDDs/PCDFs的TEQs值。
CALUX ®技术原理图 |
① 当环境中的芳香族二恶英类物质侵入细胞内之后,就和细胞质中的受体结合。
②
芳香族二恶英类物质与复合受体和可以运输至核内的蛋白质 ARNT 结合。
③
芳香族二恶英类物质/Ah受体/ARNT 的三相复合体被输送到细胞核内。 ④
三相复合体和CYP1A1基因或其他拥有XRE的基因结合,并指导合成CYP1A1酶和其他蛋白质。
(酶的诱导•细胞分裂变化•细胞分化变化)→
癌症发生•畸形儿发生•免疫异常•发育异常) |
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⑤ ④之中的 XRE 下游基因,被荧光素酶基因所转换的部分,会指导合成荧光素酶。
⑥ 各个基因所拥有的信息被转译成
mRNA 。 ⑦ 利用mRNA 的信息,合成蛋白质 = 翻译。 ⑧ 在经由④之下,CYP1A1酶和其他蛋白质被合成。
二、 CALUX ®的特点
已获得美国、欧盟、日本等国官方认可,方法成熟可靠。
高灵敏度(<1ppt)。
方法简便易用,设备相对简便。
前处理简单,且易于操作。
与HRGC/MS结果相关性很好,可靠性高。
检测周期短,3天即可出具检测报告。
价格便宜,与高分辨GC/MS上万元的检测费用相比,可节省80%以上。
耗材成本低。
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